微生物研究技術——無菌操作技術
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活菌總數;大腸菌群;大腸桿菌;腸道桿菌科;金黃色葡萄球菌;綠膿桿菌;沙門氏菌;李斯特菌;腸球菌;
亞硫酸鹽還原梭狀芽孢桿菌;產氣莢膜梭菌;霉菌(曲霉屬**、曲霉菌);酵母菌。
顯微鏡技術問世而使人類開始認識了微生物，然而在對微生物的生命活動和功能有所知曉之前，微生物學并沒有誕生。促使微生物學迅速誕生的，是無菌操作技術和純種培養技術。在1861年，偉大的微生物學家巴斯德做了一個有名的實驗。對于微生物學發展具有決定性的作用。
巴斯德用一個有長頸的圓底燒瓶裝上肉湯，如果就這么放著，幾天后肉湯便渾濁發臭了，用顯微鏡可以觀察到里面長了許多細菌。如果把長長的瓶頸用火焰燒成彎曲狀，雖然瓶口還是和外界相通，氧氣可以自由出入，可是肉湯放置很長時間也不會變渾濁。如果把里面的肉湯從彎曲處往瓶口傾折，讓液體接觸瓶口，再讓液體流回瓶中，幾天后，液體又變渾發臭了。巴斯德這個實驗充分說明，肉湯之所以變渾發臭，是肉湯里面的細菌繁殖造成的，如果加熱殺死了肉湯里面的細菌，又不讓外面的細菌進去，肉湯就不會有細菌生長。液體和瓶口接觸后，因為空氣中的塵埃和細菌沾在瓶口，通過肉湯進入瓶內，所以幾天后會變渾發臭。而且，燒瓶盡管有彎長的頸，可是瓶口是和外界相通的，空氣可以自由進入，所以可以保證里面有氧氣，所以不是沒有氧氣而使細菌不能生長。
直到20世紀６０年代，在倫敦的一個研究所中，還一直保存著19世紀后期為否定自然發生論所用的的一些陳年肉湯，它們在70年后依然清亮如故。巴斯德這個簡單但是具有說服力的有名實驗，證實了微生物只能從微生物產生而不能自然地從沒有生命的物質發生。從此，人們開始認識到無菌操作的重要。滅過菌的物質在適當保護下將保持無菌狀態，除非有人去感染它。巴斯德奠定了這個微生物學的基本原理。
-- 巴斯德否定自然發生論的實驗 --
**和**的方法：
我們知道了消除微生物對外科手術和食品保藏的重要性，也明白要研究某種微生物，實現必須保證沒有混雜由外界進入的不相干的其他微生物，就必須把培養微生物的環境徹底**。這是無菌操作的前提。100多年來，科學家們發明了各種**和**的方法。
在講述這些方法之前，我們要弄清**和**兩個不同的概念。所謂**，是指消除附著在器具或食品中的有害的（或者引起**，或者使食品腐爛）微生物。但**不一定能消滅全部微生物。例如李斯特用石炭酸處理外科手術器械并不能殺死全部微生物。因為有的微生物比較皮實，采用過激的手段殺死它們的同時容易把器具或食品破壞掉。不過這些皮實的微生物一般不會致病，在其他條件不具備時也不易生長，保留他們影響不大。如果我們的目的是研究某一種微生物，則必須保證在我們的器具中和培養它們的基質內沒有任何其他微生物混雜，這時就必須在放進要研究的某種特定微生物之前，把容器內的全部微生物殺死他們，這種處理方法就是**。
其實，在人類長期生活實踐中已經采用過**和**的方法，不過在微生物學誕生前，人們只是知其然，不知其所以然罷了。例如在沒有冰箱之前，我們知道在夏天把剩菜剩飯重新加熱后**天就不會餿，再如把得重病死亡者的用具全部付之一炬。這就是**和**。