實驗原理
常用的化學(xué)**劑主要有重金屬及其鹽類，酚、醇、醛等有機化合物以及碘、表面活性劑等。它們的**或抑菌作用主要是使菌體蛋白質(zhì)變性，或者與酶的—SH基結(jié)合而使酶失去活性所致。
本實驗是觀察某些常用的化學(xué)藥品在一定濃度下對微生物的致死或抑菌作用，從而了解它們的**或抑菌性能。
為了比較各種化學(xué)**劑的**能力，常以石炭酸為標(biāo)準(zhǔn)，即將某一**劑作不同稀釋后，在一定條件下，一定時間內(nèi)致死全部供試微生物的*高稀釋濃度，與達到同樣效果的石炭酸的*高稀釋度的比值，稱為這種**劑對該種微生物的石炭酸系數(shù)（酚系數(shù)）。石炭酸系數(shù)越大，說明該**劑**能力越強。
實驗試劑
牛肉膏蛋白胨瓊脂培養(yǎng)基，2．5％碘酒，0．1％升汞（HgCl2），5％石炭酸，75％酒精，1％來蘇爾，0．25％新潔爾滅， 0．005％龍膽紫，0．05％龍膽紫；
實驗設(shè)備
培養(yǎng)皿，濾紙片，試管，吸管等。
實驗材料
大腸桿菌，白色葡萄球菌（Staphylococcus albus）；
實驗步驟（化學(xué)因素對微生物的影響）
1．各種化學(xué)藥品的**作用
(1)用無菌吸管吸取培養(yǎng)18小時的白色葡萄球菌菌液0．2ml于無菌平皿內(nèi)。
(2)倒入已溶化并冷至45℃左右的牛肉膏蛋白胨瓊脂培養(yǎng)基于上述平皿內(nèi)，充分搖勻，水平放置，待凝。
(3)將上述已凝固的平皿用記號筆在平皿底劃成八等份，每一等份內(nèi)標(biāo)明一種藥物的名稱。
(4)用無菌鑷子將小圓形濾紙片分別浸入各種藥品中，取出，并在試管內(nèi)壁上除去多余藥液后，以無菌操作將紙片對號放入培養(yǎng)皿的小區(qū)內(nèi)，如圖Ⅸ-1。
(5)將上述放好濾紙片的含菌平皿，倒置于37℃溫室中培養(yǎng)24小時后，取出測定抑菌圈大小，并說明其**強弱。
2．石炭酸系數(shù)的測定
?。?）將5％（1：20）的石炭酸液按表Ⅸ-1配成不同濃度，每管5ml。
?。?）將待測藥物（來蘇爾）先配成1：20的原液，再按表Ⅸ-2配成不同濃度，每管 5ml。
（3）取肉膏蛋白胨液體培養(yǎng)基30管，1—15管標(biāo)明石炭酸的5種濃度，每種濃度3管，每3管分5、10、15分鐘處理，16—30管標(biāo)明來蘇爾的5種濃度，同樣每種濃度3管，每3管分5、10、15分鐘處理。
（4）在上述不同濃度的石炭酸和來蘇爾溶液中，各接入0．5ml大腸桿菌液，搖勻。注意每管自接種時起在5、10、15分鐘，用同一接種環(huán)從各管內(nèi)取一環(huán)接入上述已標(biāo)記的液體培養(yǎng)基試管中。
?。?）置37℃溫室中培養(yǎng) 48小時，觀察并記錄生長情況。生長者溶液混濁，以“ ”表示；不生長者溶液澄清，以“-”表示。
?。?）計算系數(shù)值 找出在5分鐘生長，而在10分鐘和15分鐘均不生長的石炭酸及來蘇爾的*大稀釋度，計算二者的比值。例如石炭酸在10分鐘內(nèi)殺死大腸桿菌的*大稀釋度是1：70，來蘇爾是1：250，則來蘇爾的石炭酸系數(shù)為250/70=3．6。
結(jié)果
（1）各種化學(xué)藥品對白色葡萄球菌的致死能力
(2)石炭酸系數(shù)的測定和計算
