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    技術(shù)文章

    化學(xué)因素對微生物的影響


    實驗原理

     

    常用的化學(xué)**劑主要有重金屬及其鹽類,酚、醇、醛等有機化合物以及碘、表面活性劑等。它們的**或抑菌作用主要是使菌體蛋白質(zhì)變性,或者與酶的—SH基結(jié)合而使酶失去活性所致。
      
    本實驗是觀察某些常用的化學(xué)藥品在一定濃度下對微生物的致死或抑菌作用,從而了解它們的**或抑菌性能。
      
    為了比較各種化學(xué)**劑的**能力,常以石炭酸為標(biāo)準(zhǔn),即將某一**劑作不同稀釋后,在一定條件下,一定時間內(nèi)致死全部供試微生物的*高稀釋濃度,與達到同樣效果的石炭酸的*高稀釋度的比值,稱為這種**劑對該種微生物的石炭酸系數(shù)(酚系數(shù))。石炭酸系數(shù)越大,說明該**劑**能力越強。
     

     

    實驗試劑

    牛肉膏蛋白胨瓊脂培養(yǎng)基,2.5%碘酒,0.1%升汞(HgCl2),5%石炭酸,75%酒精,1%來蘇爾,0.25%新潔爾滅, 0.005%龍膽紫,0.05%龍膽紫;

    實驗設(shè)備

    培養(yǎng)皿,濾紙片,試管,吸管等。

    實驗材料

    大腸桿菌,白色葡萄球菌(Staphylococcus albus);

    實驗步驟(化學(xué)因素對微生物的影響)

     

    1.各種化學(xué)藥品的**作用
      (1)用無菌吸管吸取培養(yǎng)18小時的白色葡萄球菌菌液0.2ml于無菌平皿內(nèi)。
      (2)倒入已溶化并冷至45℃左右的牛肉膏蛋白胨瓊脂培養(yǎng)基于上述平皿內(nèi),充分搖勻,水平放置,待凝。
      (3)將上述已凝固的平皿用記號筆在平皿底劃成八等份,每一等份內(nèi)標(biāo)明一種藥物的名稱。
      (4)用無菌鑷子將小圓形濾紙片分別浸入各種藥品中,取出,并在試管內(nèi)壁上除去多余藥液后,以無菌操作將紙片對號放入培養(yǎng)皿的小區(qū)內(nèi),如圖Ⅸ-1。
      (5)將上述放好濾紙片的含菌平皿,倒置于37℃溫室中培養(yǎng)24小時后,取出測定抑菌圈大小,并說明其**強弱。
      
    2.石炭酸系數(shù)的測定
      (1)將5%(1:20)的石炭酸液按表Ⅸ-1配成不同濃度,每管5ml。
      (2)將待測藥物(來蘇爾)先配成1:20的原液,再按表Ⅸ-2配成不同濃度,每管 5ml。
     
           

       (3)取肉膏蛋白胨液體培養(yǎng)基30管,1—15管標(biāo)明石炭酸的5種濃度,每種濃度3管,每3管分5、10、15分鐘處理,16—30管標(biāo)明來蘇爾的5種濃度,同樣每種濃度3管,每3管分5、10、15分鐘處理。
       (4)在上述不同濃度的石炭酸和來蘇爾溶液中,各接入0.5ml大腸桿菌液,搖勻。注意每管自接種時起在5、10、15分鐘,用同一接種環(huán)從各管內(nèi)取一環(huán)接入上述已標(biāo)記的液體培養(yǎng)基試管中。
     
           

      (5)置37℃溫室中培養(yǎng) 48小時,觀察并記錄生長情況。生長者溶液混濁,以“ ”表示;不生長者溶液澄清,以“-”表示。
      (6)計算系數(shù)值 找出在5分鐘生長,而在10分鐘和15分鐘均不生長的石炭酸及來蘇爾的*大稀釋度,計算二者的比值。例如石炭酸在10分鐘內(nèi)殺死大腸桿菌的*大稀釋度是1:70,來蘇爾是1:250,則來蘇爾的石炭酸系數(shù)為250/70=3.6。

    結(jié)果 
    (1)各種化學(xué)藥品對白色葡萄球菌的致死能力

           
      
    (2)石炭酸系數(shù)的測定和計算

           

     
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